Hva er celler transfeksjon, og det er de forskjellige transfeksjonsmetoder?

Cell Transfeksjon

Fremgangsmåte for bevisst å introdusere nukleinsyrer, slik som deoksyribonukleinsyre (DNA) eller ribonukleinsyre (RNA) i eukaryote celler er kjent som transfeksjon når den utføres i pattedyrceller. Den samme fremgangsmåte som er referert til som Transformation, når de er utført på bakterier, planter, sopp og alger. Transfeksjon er meget nyttig prosess brukt i studien av gener og utforme strategier knyttet til gener terapi.

Fremgangsmåte ifølge transfeksjon vanligvis innebærer åpning av forbigående hull i mottaker cellemembranen for å muliggjøre mottak av materialet. Proteiner eller ytre genetisk materiale mates inn gjennom disse åpninger, og de transfekterte cellene blir trukket inn for å smelte fremmed materiale med sitt eget materiale. Således Transfeksjon ved elektroporering av kalsiumfosfat eller ved integrering av kationisk lipid med materialet for å frembringe liposomer, som blander seg med cellemembranen og avsette sin last inni.

Cell transfeksjon refererer således til genet leveringsmåte som innfører fremmed DNA inn i cellen. Sykdommer som hjertesykdommer, AIDS, fedme og kreft krever genetiske behandlinger som kan utvikles ved hjelp av transfeksjonsmetoder. Denne teknikken brukes av forskere for å skape transgene dyr, og også til å heve bedre varianter av kjæledyr dyr, planter, blomster og frukter.

Naturen av Cell transfeksjon kan enten være forbigående eller stabil. Når cellen eliminerer innførte fremmede DNA, før mitose eller ved mitose, er det referert til som forbigående celle transfeksjon. Mens stabil celle transfeksjon refererer til prosessen når det innførte DNA legger til eller skifter ut et parti av det native DNA i cellen, ved registrering av cellekjernen. Denne type celle transfeksjon fører til transformasjon av cellen som et resultat av dette, er det en duplisering av DNA-endringen under mitose.

Forskjellige transfeksjonsmetoder

Forskere kan lett fremkalle mange stabil celle transfeksjon ved å benytte kjemiske reagenser og nøye strukturerte metoder. De er således i stand til å dyrke en cellekultur med en ønsket genetisk endring. Det finnes flere andre metoder som celletransfeksjoner utføres. Disse består i hovedsak av de biokjemiske celle transfeksjonsmetoder slik som DEAE-dekstran, kalsiumfosfat og liposom-mediert transfeksjon metoder og fysiske celle transfeksjonsmetoder som direkte mikro- injeksjon av materialer, elektroporering og biolistic partikkel levering. Her har vi beskrevet en kort tre transfeksjonsmetoder.

DEAE-Dextran metoden

Denne celle transfeksjon metoden muliggjør binding av DNA til cellemembranen og inngang gjennom endocytose. DNA i forbindelse med DEAE-dekstran gir kompleks binding til celleoverflaten. Dette er den eneste metode som ikke kan benyttes for stabil transfeksjon.

Electroporation

I denne celle transfeksjon metoden, er høyspente strømstøt benyttes for å innføre DNA inn i cellene. Denne fremgangsmåte fører derfor til en økning i permeabilitet og den elektriske ledningsevne av plasmamembranen av cellen på grunn av en ytre påført elektrisk støt. Denne celle transfeksjon metoden kan brukes for stabil transfeksjon i tillegg.

Liposom-mediert metode

Denne celle transfeksjon metoden gjør bruk av kationiske lipider, som er fysisk og kjemisk lik den biologiske lipider. Liposompreparater mediert celle transfeksjonsmetoder kan bære DNA større enn virus og blir derfor betraktet som sikrere enn virus
.